Câu Hỏi Thường Gặp

  • Tất cả các oligonucleotide DNA mà ABT cung cấp đều được tổng hợp về mặt hóa học, không phải bằng enzyme. Vì thế nên là không có DNase hoặc Rnase trong sản phẩm.

    Tuy nhiên, khách hàng nên biết rằng có rất nhiều nuclease hiện diện trong hầu hết các môi trường, vì vậy việc thực hành tốt trong phòng thí nghiệm là rất quan trọng để giảm thiểu khả năng ngoại nhiễm.

Các oligonucleotide do ABT cung cấp được khử muối- bước tinh sạch tiêu chuẩn. Đầu tiên, không có muối vô cơ, chẳng hạn như natri hoặc magiê, được sử dụng khi tổng hợp DNA về mặt hóa học. Bước khử muối tiêu chuẩn của chúng tôi đề cập đến việc loại bỏ các phân tử hữu cơ nhỏ còn sót lại sau quá trình tổng hợp. Ví dụ: acrylonitrile sinh ra từ sự mất bảo vệ của mạch chính phosphodiester, là sản phẩm phụ còn sót lại từ quá trình phân cắt và khử bảo bảo vệ. Đối với nhiều kỹ thuật/ứng dụng, bao gồm cả PCR, việc khử muối có thể được chấp nhận đối với các bazơ oligonucleotide nhỏ hơn 35 bases. Các oligonucleotide dài hơn có thể cần được tinh sạch thêm, chẳng hạn như Cartridge. .Quá trình khử muối sẽ loại bỏ phần lớn các phân tử hữu cơ này, tuy nhiên một lượng rất nhỏ vẫn có thể tồn tại trong một oligo được vận chuyển.

  • Để bảo quản oligo lâu dài, nhiệt độ là yếu tố quan trọng nhất cần xem xét. Để bảo quản lâu dài, cho dù oligo được làm khô hay dạng lỏng không được xử lý DEPC hoặc dung dịch đệm TE (10 mM Tris pH 8,0, 0,1 mM EDTA), chúng tôi khuyến cáo nên bảo quản oligo ở –20°C .

    Khi được bảo quản, oligo ổn định trong ít nhất 60 tuần khi bảo quản dạng sấy khô hoặc được hoàn nguyên lại trong nước hoặc dung dịch đệm TE không được xử lý DEPC (10 mM Tris pH 8,0, 0,1 mM EDTA).

    Điều quan trọng cần lưu ý là đối với DNA oligos, độ pH axit có thể gây ra quá trình khử purin, do đó việc duy trì độ pH trung tính là rất quan trọng.

Nồng độ tối ưu thường sử dụng là 500 nM của mỗi mồi trong phản ứng.

  • Danh mục chiều dài oligo ngắn nhất mà ABT có thể tổng hợp được có độ dài 6 base. Để biết danh sách các hạn chế về độ dài DNA Oligo tùy chỉnh của chúng tôi, vui lòng truy cập trang danh mục DNA Oligos của chúng tôi.
  •  
  • ABT sẽ xem xét các yêu cầu về oligo ngắn hơn. Nếu quan tâm, hãy liên hệ với chúng tôi và nêu chi tiết những gì bạn muốn về trình tự, quy mô, độ tinh khiết, v.v. và nó sẽ được chúng tôi xem xét. Lưu ý rằng quá trình xem xét này mất một khoảng thời gian

Oligo khử muối tiêu chuẩn có thể được sử dụng trong các ứng dụng PCR, qPCR và giải trình tự DNA thông thường.

Khi nhận sản phẩm oligo dạng sấy khô, Oligo có thể được hoàn nguyên trong dung dịch đệm TE (10 mM Tris pH 8,0, 0,1 mM EDTA) hoặc nước cất sinh học phân tử.

Chúng tôi tổng hợp các oligo theo hướng 3′ ─> 5′ trên hạt CPG bằng cách sử dụng chất hóa học amidite.

Quá trình tinh chế loại bỏ các sản phẩm bị shortmer (bị cắt ngắn) và các tạp chất tổng hợp khác. Kinh nghiệm của chúng tôi cho thấy rằng việc tinh chế oligonucleotide sẽ được sử dụng trong các ứng dụng có yêu cầu độ tinh sạch cao sẽ tiết kiệm cả thời gian và chi phí về lâu dài. Chúng tôi khuyên bạn nên xem xét quá trình tinh chế bổ sung cho bất kỳ oligonucleotide nào sẽ được sử dụng cho một ứng dụng khác ngoài giải trình tự DNA PCR, qPCR hoặc Sanger thông thường.